Antígenos bacterianos

Práctica 6 - 29.11.19

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ANTICUERPOS FEBRILES.

PRINCIPIO DEL MÉTODO:

Los antígenos son una técnica de aglutinación en tubo para la detección y semicuantificación de anticuerpos anti-Salmonella, Brucella, y Proteus en suero humano. Los reactivos, suspensiones bacterianas, coloreadas y estandarizadas, aglutinan en presencia del anticuerpo homologo correspondiente en las muestras ensayadas.

SIGNIFICADO CLÍNICO:

El diagnóstico de enfermedades febriles pueden establecerse bien sea por el aislamiento del microorganismo en sangre, orina o heces por demostración del título de anticuerpos somáticos y flagerales en el suero de paciente. La determinación de estos anticuerpos forma la base para los el ensayo de Widal que establece altos niveles de anticuerpos O y H superiores a 1/100 en suero, es inactivo de infección de estos microorganismos.

REACTIVOS:

• Antigenos bacterianos: suspensión de salmonellas, Brucelas, Proteus en tampón glicina, pH 8.2 conservante.
• Controles: suero animal. Conservante.

MATERIAL ADICIONAL

• Agitador rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m.
• Estufa a 37ºC
• Agitador vórtex
• Pipetas de 50 ul

MUESTRAS

• Suero fresco.

PROCEDIMIENTO:

NOTA: Agitar los antígenos antes de usar, conservar los viales en posición vertical.

Método de aglutinación en tubo (semicuantificación)

1. Preparar una serie de tubos tal como sigue:

2. Preparar dos tubos más para control positivo y negativo: 0.1 mL Control + 0.9 ml ClNa 9 g/l
3. Añadir una gota de antígeno a cada tubo.

4. Agitar e incubar los tubos a 37ºC durante 24h.