RPR-carbon

PRACTICA 7

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE REAGINAS PLASMÁTICAS 

PRINCIPIO DEL MÉTODO:

RPR-Carbón  es una técnica no treponémica de aglutinación en porta para la detección cuaitativa y semicuantitativa de reaginas plasmáticas en suero humano. Las partículas de carbón sensibiliadas con una mezcla de lípidos, son aglutinados en presencia de reaginas presentes en la muestra del paciente afectado por sífilis.

SIGNIFICADO CLÍNICO:

Las reaginas son un grupo de anticuerpos dirigidos contra componentes del propio organismo originadas en pacientes que sufren infección por Treponema pallidum, agente causal de la sífilis. Este microorganismo produce lesiones en el hígado y corazón, liberando al torrente circulatorio pequeños fragmentos de estos órganos no reconocidos por el propio individuo. El sistema inmunológico del paciente reacciona dando lugar a la formación de reaginas, anticuerpos frente a estos fragmentos.
El ensayo es útil para seguir la respuesta a la terapia antibiótica.

REACTIVOS:

• RPR carbón
• Control +
• Control -

MATERIAL ADICIONAL:

• Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 rpm
• Cámara húmeda
• Agitador vortex 
• Pipetas de 50 ul

MUESTRA:

• Suero

PROCEDIMIENTO:

1.Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.

2.Depositar 50 ul de la muestra a ensayar en una gota de cada uno de los controles Positivo y negativo, sobre círculos distintos del porta.

3. Mezclar el reactivo de RPR-carbón vigorosamente o con el agitador vortex antes de usar. Invertir el vial dispensador y `presionar ligeramente para eliminar las burbujas de aire.

4. Situar la micropipeta en posición vertical y perpendicular al porta, y dispensar una gota de este reactivo junto a cada una de las gotas anteriores.

5.Mezclar las gotas con una ùnta de pipeta, procurando extender la por toda la superficie interior del círculo. Empleando puntas distintas para cada muestra.

6. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80-100 rpm durante 8 min. El exceso de tiempo puede originar la aparición de falsos positivos.