Rosa de Bengala

PRACTICA 6

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ANTICUERPOS ANTI-BRUCELLA 

PRINCIPIO DEL MÉTODO:

El Rosa de Bengala es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuentitativa de anticuerpos anti-Brucellaen suero humano. La suspensión bacteriana y coloreada, es aglutinada por anticuerpos IgG o IgM presentes en el suero del paciente.

SIGNIFICADO CLÍNICO:

El diagnóstico de la brucelosis puede establecerse bien sea por el aislamiento del microorganismo en sangre o heces o por la demostración de la presencia de anticuerpos específicos en el suero del paciente. El reactivo, debido a su formulación en un tampón de pH ácido, es capaz de reaccionar con anticuerpos IgG o IgM, por lo que es muy útil para el diagnóstico de individuos en fase crónica de la enfermedad , los cuales presentan un nivel elevado de anticuerpos IgG difícilmente detectables por el método tradicional de aglutinación en tubo (Wright)

REACTIVOS:

• Rosa de bengala
• Control +
• Control -

MATERIAL ADICIONAL:

• Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 rpm
• Agitador vortex
• Pipetas de 50 ul

PROCEDIMIENTO:

1.Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo sdisminuye a temperaturas bajas

2. Depositar 50 ul de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles positivo y negativo, sobre circulos distintos de un porta

3.Mezclar el reactivo de R. de bengala vigorosamente o con el agitador vortex antes de usar, Juntar una gota junto a cada una de las gotas anteriores.

4.Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. empleando puntas de pipeta distintas para cada muestra.

5.Agitar durante 4 min 

Método semicuantitativo

1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/l 

2.Procedemos para cada dilución, como en la prueba cualitativa.