Estreptolisina O Liofilizada.

Práctica 11

Determinación del título de anti-slo.

Sumario

La estreptolisina O liofilizada, es un purificado procedente del cultivo de Estreptococos B-hemolíticos. Se trata de un producto estandarizado para la determinación cuantitativa del título de antiestreptolisina O, por la técnica de inhibición de la hemólisis.

Principio

El carácter inmunogénico de la SLO permite valorar la extensión de una infección estreptocócica, por simple titulación del nivel en suero de anticuerpos anto-SLO.
Diluciones crecientes del suero problema se enfrentan con una cantidad constante de SLO, en presencia de una suspensión de hematíes, determinándose la dilución de suero más allá capaz de inhibir el poder hemolítico de la toxina. La inversa de dicha dilución corresponde al título del suero

Reactivos:

• Estreptolisina O liofilizada

Muestra

• Suero fresco

Técnica:

1. Suspensión de hematíes, tomando el último paquete globular 3 ml y suspenderlos con 97 ml de dilución tampón fosfato pH 6.5

2. Dilución del suero:
0.2ml de suero + 1.8ml tampón 
0.1ml de suero +2.4 ml tampón

3. Controles:
Estreptolisina O: 25 ul de SLO+ 25 il de suspensión de hematíes al 3%
Hematíes: 25 ul tampón+ 25 ul de suspensión de hematíes al 3%

NOTA: Tras la dilución SLO meteremos la placa 15 minutos a 37º en la estufa.
Y tras la suspensión de hematíes la meteremos 45 minutos, sacándola a los 15 para agitar un poco.