TOXO-HAI FUMOUZE

PRACTICA 4

SERODIÁGNOSTICO DE LA TOXOPLASMOSIS POR HEMOGLUTINACIÓN DIRECTA.

OBJETIVO:

Determinación cuantitativa de anticuerpos séricos dirigidos contra Toxoplasma gondii por hemaglutinación indirecta.

PRINCIPIO:

Se basa en el principio de la hemaglutinación indirecta. Los hematíes sensibilizadosestán constituidos por hematíes de ovino recubiertos por un antígeno toxoplasmático. Esta técnica permite detectar lo IgG y las IgM anti-toxoplasmáticas. Es posible diferenciarlos tratando el suero con 2-mercaptoetanol el cual inhibe el el poder aglutinante de las IgM.

La presencia de anticuerpos anti-Toxoplasma gondii séricos provoca una aglutinación indirecta. Los hematíes sensibilizados que se traduce en un velo rojo/marrón que tapiza el pocillo. En ausencia de anticuerpos específicos, estos hematíes se sedimentan en el fondo del pocillo como un anillo.

Los hematíes no sensibilizados aseguran la especificidad de la reacción y permiten eliminar las interferencias debidas a las aglutininas naturales anti-ovino (heteroanticuerpos de Forssman, anticuerpos de mononucleosis infecciosa...).

La reacción se efectúa en microplata con fondo de U.

La manipulación es simple y rápida. Los resultados se obtienen en 2 horas.

COMPOSICIÓN DEL EQUIPO

• Hematíes sensibilizados (origen animal)
• Hematíes no sensibilizados (origen animal)
• Tampón fosfato pH 7,2
• Absorbente (origen animal)
• Conyrol negativo (origen animal)
• 2microplacas con fondo en U
• 2 cuenta-gotas especiales para dispersar alrededor de 16 ul
• Material necesario pero no suministrado.
• Micropipeta para dispersar 50 ul, micropipeta 100-1000ul
• Contenedor para desechos contaminados
• Tubos para hemólisi
• Centrífuga
• 2-mercaptoetanol

PRECAUCIONES DE USO:

• Agitar cuidadosamente las suspensiones de hematíes antes del uso
• Al dispensar las suspensiones de hematíes poner el cuentagotas perfectamente vertical

PROCEDIMIENTO DEL ANÁLISIS: