FR-Latex
PRÁCTICA Nº1 24/09/19
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE FACTORES REUMATOIDES (FR)
PRINCIPIO DEL MÉTODO:
El FR-látex es una técnica de aglutinación en porta por la detección cualitativa y semicuantitativa de factores reumatoides (FR) en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores reumatoides presentes en la muestra del paciente.SIGNIFICADO CLÍNICO:
Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de las inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de desordenes reumáticos, tales como el lupus eritematoso sistémico (SLE) y el síndrome de Sjögren, su principal interés clínico radica en el diagnostico de la artritis reumatoide (RA).
Un estudio actual realizado por el "American College of Rheumatolgy) demostró que el 80,4% de pacientes con artritis reumatoide fueron positivos para el FR.
REACTIVOS:
Látex: Suspensión de partículas de látex cubiertas con gamma-globulina humana pH, 8.2. Conservante. Contiene N,N-dimetilformamida.
Control + (Tapón rojo): suero humano con una concentración de FR>30 Ul/mL. conservante.
Control - (tapón azul): Suero animal conservante.
MATERIAL ADICIONAL:
- Pipetas de 50 ul
- Palillos de plástico.
PROCEDIMIENTO:
Método cualitativo:
1. Atemperamos los reactivos y la muestra a temperatura ambiente.
2. Depositamos 50ul a la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y negativo, sobre uno de los círculos, en esta parte solo vamos a usar dos uno para Inés y otro para mi.
3. Mezclar el reactivo de FR-látex vigorosamente o con el agitador vórtex antes de usar. Depositar una gota (50ul) junto a cada uno de las gotas anteriores.
4. Mezclamos las gotas con el palillo (usamos uno distinto para cada muestra), extendiendo la muestra por la superficie interior del círculo.
5.Lo agitamos con la mano durante 2 min, pero sale negativo, cuando debería de ser positivo.
Método semicuantitativo:
1. Realizamos diluciones de la muestra en solución salina 9g/L:
depositamos una gota de control, otra de solución salina en todos los círculos y solo en el primero le añadimos una gota del reactivo (látex) y mezclamos con el palillo igual que en la cualitativa
A continuación cojemos 50ul del primer círculo, se lo añadimos al segundo y mezclamos, posteriormente hacemos lo mismo con los siguientes.
2. Lo agitamos con la mano durante 2 minutos, vuelve a salir negativo.
NOTA: deducimos en el semicuantitativo que es por las cantidades re reactivo, por lo que repetimos el cualitativo y sigue sin salir, por lo que llegamos a que el fallo está en el reactivo del paciente, ya que usamos el reactivo de la mesa 1 y sale positivo.
Método cualitativo:
1. Atemperamos los reactivos y la muestra a temperatura ambiente.
2. Depositamos 50ul a la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y negativo, sobre uno de los círculos, en esta parte solo vamos a usar dos uno para Inés y otro para mi.
3. Mezclar el reactivo de FR-látex vigorosamente o con el agitador vórtex antes de usar. Depositar una gota (50ul) junto a cada uno de las gotas anteriores.
4. Mezclamos las gotas con el palillo (usamos uno distinto para cada muestra), extendiendo la muestra por la superficie interior del círculo.
5.Lo agitamos con la mano durante 2 min, pero sale negativo, cuando debería de ser positivo.
Método semicuantitativo:
1. Realizamos diluciones de la muestra en solución salina 9g/L:
depositamos una gota de control, otra de solución salina en todos los círculos y solo en el primero le añadimos una gota del reactivo (látex) y mezclamos con el palillo igual que en la cualitativa
A continuación cojemos 50ul del primer círculo, se lo añadimos al segundo y mezclamos, posteriormente hacemos lo mismo con los siguientes.
2. Lo agitamos con la mano durante 2 minutos, vuelve a salir negativo.
NOTA: deducimos en el semicuantitativo que es por las cantidades re reactivo, por lo que repetimos el cualitativo y sigue sin salir, por lo que llegamos a que el fallo está en el reactivo del paciente, ya que usamos el reactivo de la mesa 1 y sale positivo.
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